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當前位置:首頁產品中心實驗試劑試劑盒K61003MagVigen™ – Plasma DNA Capture

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

產品簡介

MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲試劑盒 (K61003) 能夠從血漿和血清中捕獲小的循環游離 DNA (>30bp)。MagVigen™ – Plasma DNA Capture

更新時間:2024-03-19
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品牌其他品牌供貨周期一個月
應用領域醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

產品內容

  • MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲納米顆粒

  • 裂解緩沖液

  • 蛋白酶K

  • 蛋白酶 K 緩沖液

  • 洗滌緩沖液 1 庫存

  • 洗脫緩沖液

所需材料

  • 異丙醇

  • 乙醇

  • 十二烷基硫酸鈉,20%

  • 磁性架(NVIGEN Cat# A20006)

MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲試劑盒 (K61003) 能夠從血漿和血清中捕獲小的循環游離 DNA (>30bp)。

Protocols

  1. 準備血漿樣品:如果使用冷凍血漿,請在室溫下解凍。將血漿以 12000x g 離心 5 分鐘,以去除任何血液和細胞碎片。


  2. 制備裂解緩沖液:如果有固體,則在 60°C 下加熱幾分鐘以制成澄清溶液。


  3. 制備蛋白酶溶液:將蛋白酶 K 緩沖液添加到蛋白酶 K 粉末瓶中。渦旋混合均勻。儲存于-20°C。


  4. 制備洗滌緩沖液 1:根據表 1 計算所需量。向每 550 ul 洗滌緩沖液 1 原液中添加 450 ul 異丙醇。每次都新鮮制作緩沖液。


  5. 檢查表1的總體積來決定使用的離心管類型(1.5ml、2ml、5ml、15ml或50ml)。


  6. 將蛋白酶 K 溶液添加到樣品管底部,將血漿添加到管中。渦旋 5 秒以充分混合,短暫離心。


  7. 將 20% SDS 添加到管中。渦旋 5 秒以充分混合,短暫離心。


  8. 將裂解緩沖液添加到管中。渦旋 1 分鐘以充分混合。短暫地旋轉下來。 60°C 孵育 30 分鐘。


  9. 添加 MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲納米顆粒。輕輕搖動小瓶使其分散。然后加入異丙醇,渦旋混勻,短暫離心,繼續渦旋 45 分鐘。


  10. 將反應管放在磁力架上沉淀珠子,直至溶液澄清(10-20 分鐘,具體取決于磁鐵的強度和樣品體積)。


  11. 慢慢除去上清液。小心不要帶走任何珠子,盡可能多地除去溶液。將磁力架敲擊固體表面,使殘留溶液沉降到管底,除去所有上清液。


  12. 將管從磁鐵上取下,添加洗滌緩沖液 1。通過移液或渦旋混合。如果從較大的 15 或 50 ml 試管開始,請將溶液轉移到 1.5 或 2 ml 試管中。短暫地旋轉下來。將珠子放在磁力架上沉淀(約 10 分鐘),除去上清液。將磁力架敲擊表面。除去所有上清液。


  13. 使用 75% 乙醇清洗珠粒。不需要全分散珠粒。管子可以通過磁力架保持在適當的位置。稍微向前和向后傾斜裝有樣品管的磁力架。然后短暫旋轉,使蓋子中沒有溶液殘留。將珠子放在磁力架上(約 3 分鐘)并除去所有上清液。在固體表面上敲擊磁力架,使上清液殘留物沉降到管底部。除去所有上清液。


  14. 使用 75% 乙醇再次清洗珠粒。將珠子沉淀(約 2-3 分鐘)并除去所有上清液。


  15. 將管子放在磁力架上,風干沉淀以蒸發所有乙醇。這需要 2-3 分鐘。


  16. 將所需量的洗脫緩沖液添加到珠子中,上下移液直至所有沉淀物全重新分散。將珠子分散在洗脫緩沖液中 3 分鐘。


  17. 短暫地旋轉下來。然后將管子放在磁力架上 2-3 分鐘。


  18. 收集上清液,不要干擾磁珠沉淀。上清液含有提取的DNA。吸取 DNA 溶液進行下游實驗時,將管子放在磁鐵旁邊。提取的 cfDNA 溶液如果不立即使用,可保存在 -20°C。

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

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